荭草苷对脑缺血再灌注大鼠脑组织线粒体自噬的影响

摘要

目的 探讨荭草苷对脑缺血再灌注大鼠脑组织线粒体自噬的影响。方法 采用改良线栓法制备大鼠局灶性大脑中动脉缺血(MCAO)模型,将模型制备成功的大鼠随机分为3组:模型组、荭草苷组、荭草苷合用雷帕霉素组,另取不插栓线的大鼠为假手术组,每组18只。荭草苷组和荭草苷合用雷帕霉素组于术后1 h和12 h分别腹腔注射6.48μmol/kg荭草苷溶液两次,荭草苷合用雷帕霉素组于术前24 h和30 min腹腔注射2.66 mg/ml雷帕霉素溶液2次。再灌注24 h后,采用ZeaLonge评分法对各组大鼠进行神经功能损伤评分,2′3′5-氯化三苯基四氮唑(TTC)法测定MCAO大鼠脑梗死体积,分光光度法测定MCAO大鼠缺血侧脑组织线粒体中超氧化物歧化酶(SOD)活性及丙二醛(MDA)和钙离子(Ca^(2+))含量,Western印迹法测定MCAO大鼠脑组织线粒体中微管相关蛋白轻链(LC)3和B细胞淋巴瘤-2基因(Bcl-2)/E1B-19K相互作用蛋白(BNIP)3表达情况。结果 与假手术组相比,模型组神经功能损伤评分和脑梗死体积均明显升高,线粒体中MDA和Ca^(2+)含量显著增加,SOD酶活性明显降低,BNIP3和LC3蛋白相对表达明显增加(均P<0.01);与模型组相比,荭草苷治疗后大鼠脑梗死体积和神经功能评分明显降低,线粒体中MDA和Ca^(2+)含量明显降低,SOD酶活性升高,LC3和BNIP3相对表达均显著降低(P<0.05,P<0.01);与荭草苷组相比,荭草苷+雷帕霉素能明显升高大鼠脑梗死体积,明显降低大鼠缺血侧脑组织线粒体中SOD酶活性,MDA和Ca^(2+)含量及LC3和BNIP3蛋白相对表达水平显著升高(均P<0.05)。结论 荭草苷可能通过抑制线粒体自噬改善脑缺血再灌注导致的线粒体氧化应激反应和钙超载,减轻大鼠的脑组织损伤。