CD137和CD137配体信号通过低氧诱导因子1α调控糖酵解影响巨噬细胞吞噬及迁移功能

摘要

目的探讨CD137-CD137配体(CD137L)信号通过低氧诱导因子1α(HIF-1α)调控糖酵解影响巨噬细胞吞噬及迁移功能。方法通过巯基乙酸盐腹腔灌洗法获取C57BL/6J小鼠腹腔巨噬细胞(PM),采用混合气体饱和法建立细胞低氧环境。PM分为对照组、低氧组、CD137激动组、HIF-1α过表达组和糖酵解激动组。采用Western blot检测各组HIF-1α、葡萄糖转运蛋白1(GLUT1)、糖酵解关键酶己糖激酶(HK2)、果糖-2,6-二磷酸酶3(PFKFB3)表达,葡萄糖和乳酸试剂盒检测各组葡萄糖消耗量及乳酸产量,墨汁吞噬实验检测各组吞噬功能,划痕实验和Transwell实验检测各组迁移功能。结果CD137激动组HIF-1α、GLUT1、HK2和PFKFB3蛋白、葡萄糖消耗、乳酸产量、吞噬率、划痕愈合率和迁移的巨噬细胞数明显低于低氧组(P<0.05,P<0.01);HIF-1α过表达组HIF-1α、GLUT1、HK2和PFKFB3蛋白、葡萄糖消耗、乳酸产量、吞噬率、划痕愈合率、迁移的巨噬细胞数明显高于CD137激动组(P<0.05,P<0.01);糖酵解激动组吞噬率、划痕愈合率和迁移的巨噬细胞数明显高于CD137激动组[(85.89±7.76)%vs(69.01±6.94)%,P<0.05;(17.43±1.76)%vs(1.41±0.52)%,P<0.01;(176±16)个vs(48±10)个,P<0.01]。结论CD137-CD137L信号可能通过HIF-1α调控糖酵解影响巨噬细胞吞噬及迁移功能。