肝细胞生长因子联合成纤维细胞生长因子-4诱导人骨髓间充质干细胞分化为肝样细胞的实验研究

摘要

目的 探讨肝细胞生长因子(hepatocyte growth factor,HGF)联合成纤维细胞生长因子-4(fibroblast growth factor-4,FGF-4)诱导人骨髓间充质干细胞(human bone marrow mesenchymal stem cells,HMSCs)向肝细胞方向分化的能力.方法 分别用HGF、FGF-4、HGF+FGF-4诱导HMSCs分化为肝样细胞.在不同分化阶段用免疫细胞化学染色法检测甲胎蛋白(alpha fetoprotein,AFP)和细胞角蛋白18(cytokeratin 18,CK18);免疫荧光细胞化学染色法检测AFP、白蛋白(albumin,ALB)的表达;RT-PCR检测AFP和ALB mRNA表达的情况.结果 HMSCs经诱导向肝样细胞转化.免疫细胞化学染色各诱导组均可检测出AFP和CK18表达,图像分析表明HGF+FGF-4联合诱导分化的AFP、CK18阳性率最高,HGF次之,FGF-4则较弱;免疫荧光细胞化学染色发现各诱导组AFP、ALB均为阳性表达;各诱导组RT-PCR均可检测出AFP和ALB mRNA的表达,而阴性对照组则没有表达.结论 HGF、FGF-4、HGF+FGF-4均能诱导HMSCs分化为肝样细胞,分化的肝样细胞能分泌肝细胞特异性产物AFP、ALB、CK18等.以HGF+FGF-4诱导HMSCs分化为肝样细胞的阳性率最高.