Fsp27基因抑制原代肝星状细胞活化与活性的实验研究

摘要

目的探讨脂肪特异性蛋白27（fat-specificprotein27,Fsp27）基因对原代肝星状细胞（hepatic stellate cells,HSCs）增殖活化的影响和对纤维化相关基因的调节作用。方法实时定量PCR检测原代与活化HSCs中Fsp27基因表达。构建携带Fsp27的慢病毒并转染原代HSCs。CCK-8比色法检测Fsp27基因对HSCs增殖的影响。Western blotting检测HSCsα肌动蛋白（α-SMA）的表达,实时定量PCR检测Fsp27基因对HSCs纤维化相关基因表达的影响。结果原代与活化HSCs的Fsp27表达差异有统计学意义（Fsp27 mRNA:2 700±500,5±2,t=124.27,P＜0.05）。带Fsp27目的基因的慢病毒转染原代HSCs 72 h后可明显抑制HSCs的活化（66.2±3.8,37.5±4.3,21.7±1.4,F=43.27,P＜0.05）与增殖（48 h:31.5±1.3,6.1±0.1,t=17.35,P＜0.05;72 h:36.2±2.2,6.2±0.1,t=21.94,P＜0.05）;Fsp27基因促进基质金属蛋白酶2表达（0.48±0.02,0.85±0.14,1.63±0.21,F=41.56,P＜0.05）,降低转化生长因子β1表达（3.2±0.17,2.0±0.3,1.7±0.2,F=21.52,P＜0.05）。结论 Fsp27基因抑制原代HSCs活化增殖,调节纤维化相关基因的表达,可能与维持HSCs静息状态细胞表型有关。