沉默信息调节因子1对缺氧条件下肠上皮屏障功能的保护作用及机制

摘要

目的观察沉默信息调节因子1（SIRT1）对肠缺氧上皮Caco-2细胞屏障功能的影响并探讨其分子机制。方法对Caco-2细胞分别进行1%O2浓度缺氧6 h（缺氧组）和常规处理（常规组）及加浓度为40μmol/L Resveratrol（SIRT1激动剂）预处理6 h后再缺氧6 h（观察组）,分别检测3组肠上皮细胞跨上皮电阻（TER）,PCR及Western blot分别检测3组SIRT1及紧密连接蛋白ZO-1、Occludin和Claudin-1的mRNA与蛋白表达。结果缺氧组SIRT1 mRNA及其蛋白的相对表达量均明显低于常规组（分别为0.40±0.02比0.70±0.07,P=0.001;0.37±0.03比0.76±0.03,P=0.001）,也明显低于观察组（0.50±0.02,P=0.026;0.54±0.02,P=0.011）。缺氧组3种紧密连接蛋白mRNA表达均低于常规组（P＜0.05）,也低于观察组（P＜0.05）,观察组的ZO-1及Claudin-1表达与常规组比较,差异无统计学意义（P＞0.05）。3种紧密连接蛋白的表达水平常规组最高,观察组次之,缺氧组最低,两两比较,差异均具有统计学意义（均P＜0.05）。常规组、缺氧组和观察组的TER分别为（142±7）Ohm/cm~2、（94+3）Ohm/cm~2和（119±7）Ohm/cm~2;两两比较,差异均具有统计学意义（均P＜0.05）。结论缺氧条件下SIRT1水平降低,而SIRT1的激活可通过增加肠道紧密连接蛋白ZO-1、Occludin和Claudin-1 mRNA与蛋白的表达,从而减轻缺氧对肠上皮屏障功能的损伤。