重组人白细胞介素-2基因痘苗病毒真核表达载体的构建与鉴定

摘要

目的:构建含人白细胞介素-2(hIL-2)基因的痘苗病毒真核表达载体pMJ601,为进一步实施胃癌的基因治疗作必要准备.方法:利用质粒抽提、琼脂糖凝胶电泳、酶切、目的基因与载体的连接、感受态细胞的制备及转化和DNA序列分析等多种基因工程技术,将纯化回收的hIL-2基因分别与质粒pBlue8criptⅡSK+/一及pMJ601进行连接、转化并鉴定.结果:克隆有hIL-2基因的pLXSN经EcoRI-BamHl酶切后,hIL-2基因被成功地连接到质粒pBluescriptⅡSK+/一上,再经SalI-BamHI酶切后,hIL-2基因又被克隆到pMJ601真核表达载体上.结论:重组hIL-2基因痘苗病毒真核表达载体pMJ601的构建为胃癌的免疫基因治疗打下了坚实的基础.