肿瘤坏死因子α诱导蛋白8通过调控上皮-间充质转化影响前列腺癌细胞的侵袭与转移

摘要

目的探讨前列腺癌细胞内肿瘤坏死因子α诱导蛋白8（TNFAIP8）的表达变化对其侵袭与转移能力的影响, 及在此过程中有无上皮-间充质转化（EMT）参与。方法设计合成靶向抑制TNFAIP8基因的短发卡RNA（shRNA）慢病毒质粒（shTNFAIP8）, 转染前列腺癌PC3细胞, 分为shTNFAIP8组（转染TNFAIP8 shRNA）, 空载细胞组（转染对照shRNA）和阴性对照组（未转染）, 反转录-聚合酶链反应（RT-PCR）和蛋白质印迹法（Western blot）检测3组TNFAIP8和EMT相关标志物E-钙黏蛋白（E-cadherin）、波形蛋白（Vimentin）、N-钙黏蛋白（N-cadherin）和紧密连接蛋白（ZO1） mRNA及蛋白表达水平, 通过细胞划痕和Transwell小室侵袭实验检验3组细胞侵袭与转移能力。组间比较采用t检验。结果 shTNFAIP8组Vimentin和N-cadherin mRNA及蛋白表达量（0.51±0.17、0.32±0.11、0.29±0.04、0.25±0.05）明显低于阴性对照组（1.00±0.32、1.00±0.23、0.63±0.10、0.65±0.07, t= 3.024、5.964、7.059、10.401, P＆0.05）及空载细胞组（1.00±0.26、1.00±0.26、0.61±0.13、0.63±0.08, t=3.527、5.386、5.261、9.007, P＆0.05）, 而E-cadherin和ZO1 mRNA及蛋白表达量（4.21±1.12、2.70±0.87、0.49±0.07、0.52±0.08）明显高于阴性对照组（1.00±0.14、1.00±0.26、0.31±0.06、0.39±0.05, t= 6.359、4.186、4.679、3.081, P＆0.05）及空载细胞组（1.00±0.21、1.00±0.24、0.27±0.05、0.39±0.07, t=6.299、4.212、5.719、2.735, P＆0.05）, 差异有统计学意义。shTNFAIP8组24 h后的划痕愈合百分比[（0.72±0.12）%]高于阴性对照组[（0.52±0.11）%]及空载细胞组[（0.53±0.12）%], 差异有统计学意义（t=2.747、2.372, P＆0.05）。shTNFAIP8组穿膜细胞数[（52±17）个]少于阴性对照组[（141±34）个]及空载细胞组[（150±45）个], 差异有统计学意义（t=5.235、4.555, P＆0.05）。结论下调表达TNFAIP8可通过调控EMT抑制前列腺癌细胞的侵袭与转移。