微小RNA-223-3p靶向叉头框转录因子1对乳腺癌细胞增殖和凋亡的影响

摘要

目的观察微小RNA（miRNA,miR）-223-3p靶向叉头框转录因子1（FoxO1）对乳腺癌细胞增殖和凋亡的影响并探讨其分子机制。方法采用荧光定量聚合酶链反应（PCR）分析正常乳腺细胞HBL-100（购自中国医学科学院细胞库）和乳腺癌细胞MCF-7（购自中国科学院细胞库）细胞中miR-223-3p的表达;采用脂质体转染miR-223-3p模拟物、抑制剂和对照质粒于MCF-7细胞。采用荧光定量PCR检测转染miR-223-3p模拟物、抑制剂和对照质粒的细胞中miR-223-3p表达水平。采用细胞计数试剂盒（CCK-8）测定细胞细胞增殖。采用膜联蛋白V-异硫氰酸荧光素（Annexin V-FITC）法检测不同处理的细胞凋亡率。生物信息学和双荧光素酶报告基因分析miR-223-3p的靶基因。采用蛋白质印迹法（Western blot）分析miR-223-3p靶基因蛋白质表达。组间数据比较采用t检验。结果与正常乳腺细胞miR-223-3p表达水平（1.09±0.14）比较,乳腺癌MCF-7细胞mRNA-223-3p表达水平（2.37±0.19）显著增加,差异有统计学意义（t=3.281,P＆0.05）。转染72 h,转染miR-223-3p模拟物的细胞miR-223-3p表达水平（2.89±0.20）较转染对照质粒的细胞（0.97±0.19）显著增加,差异有统计学意义（t=2.619,P＆0.05）。转染miR-223-3p抑制剂的细胞miR-223-3p表达水平（0.33±0.12）较转染对照质粒的细胞（0.97±0.19）显著下降,差异有统计学意义（t=3.111,P＆0.05）。转染miR-223-3p抑制剂的细胞增殖能力（1.09±0.20）较转染对照质粒的细胞增殖能力（1.94±0.27）明显下降,差异有统计学意义（t=2.891,P＆0.05）。转染miR-223-3p抑制剂的细胞凋亡率[（32.69±5.81）%]较转染对照质粒的细胞凋亡率[（5.04±1.47）%]明显增加,差异有统计学意义（t=3.001,P＆0.05）。FoxO1是miR-223-3p的靶基因。转染miR-223-3p抑制剂的细胞FoxO1蛋白表达水平（2.60±0.22）较转染对照质粒的细胞（0.58±0.19）明显升高,差异有统计学意义（t=3.185,P＆0.05）。结论 miR-223通过靶向FoxO1蛋白调控着乳腺癌细胞的增殖和凋亡。