小干扰RNA靶向保罗样激酶1基因沉默抑制结肠癌侵袭与增殖的研究

摘要

目的 探讨小干扰RNA（siRNA）靶向沉默保罗样激酶1（PLK1）对结肠癌侵袭与增殖的影响。方法 收集2013年7月至2018年9月海南医学院第二附属医院收治的结肠癌患者68例,其中男40例,女28例,平均年龄（47.5±6.2）岁。蛋白质印迹法（Western blot）和实时定量聚合酶链式反应（RT-qPCR）分别检测PLK1蛋白和mRNA水平。细胞体外侵袭实验（Transwell）和细胞增殖与毒性（CCK-8）法检测细胞侵袭和增殖能力。构建皮下异种移植裸鼠结肠癌模型进行动物实验。计量资料多组间比较采用F检验,两两比较采用t检验。率的比较采用χ2检验。相关性分析采用斯皮尔曼（Spearman）法。结果 与癌旁组织（8.72±2.19）比较,结肠癌组织（15.34±3.86）PLK1的mRNA水平显著增高（t＝12.593,P＆0.05）,且PLK1水平与肿瘤浸润深度（r＝0.368,P＆0.05）和TNM分期（r＝0.403,P＆0.05）呈正相关。与siRNA阴性对照[侵袭：（37.20±4.50）个]比较,PLK1-siRNA-1[侵袭：（15.00±3.75）个]和PLK1-siRNA-2[侵袭：（14.60±3.40）个]处理后SW480细胞侵袭能力均显著下降（t＝5.073、4.985,P＆0.05）。在24、48、72 h时,与siRNA阴性对照[吸光度（A）值0.53±0.12、0.73±0.16、0.86±0.18]比较,PLK1-siRNA-1（0.32±0.10、0.40±0.08、0.53±0.10）和PLK1-siRNA-2（0.34±0.08、0.41±0.09、0.54±0.11）处理后细胞增殖能力均显著下降（t＝4.167、4.990、4.833、4.001、4.708、4.665,P＆0.05）。与siRNA阴性对照[肿瘤体积：（849.12±65.37） mm3；结节数：（9.35±2.15）个]比较,经PLK1-siRNA-1[肿瘤体积：（135.06±9.11） mm3；结节数：1.46±0.20个]和PLK1-siRNA-2[肿瘤体积：（127.45±8.86） mm3；结节数：（1.30±0.15）个]处理的裸鼠肿瘤平均体积和腹膜内肿瘤结节数均显著降低（t＝19.168、7.004、20.365、7.659,P＆0.05）。结论 靶向沉默PLK1可抑制结肠癌的侵袭与增殖。