长链非编码RNA结直肠肿瘤差异表达基因靶向微小RNA-384对肺癌SPC-A1细胞侵袭和迁移的影响

摘要

目的 观察长链非编码RNA（lncRNA）结直肠肿瘤差异表达基因（CRNDE）靶向微小RNA（miRNA,miR）-384对人肺腺癌细胞株SPC-A1细胞侵袭和迁移的影响。方法 在肺癌SPC-A1细胞中转染小干扰RNA（siRNA） CRNDE,实时定量聚合酶链反应（Real-time PCR）测定干扰效果,噻唑蓝（MTT）法测定细胞增殖变化,Transwell小室测定细胞侵袭和迁移,蛋白质印迹法（Western blot）检测细胞中基质金属蛋白酶（MMP）-9、MMP-2、E-钙黏蛋白（E-cadherin）、波形蛋白（Vimentin）蛋白表达水平,靶向关系预测软件预测CRNDE与miR-384有结合位点,荧光素酶报告系统鉴定靶向关系。在SPC-A1细胞中共转染siRNA CRNDE和miR-384抑制物（Inhibitors）,用上述方法测定miR-384 Inhibitors对siRNA CRNDE影响肺癌SPC-A1细胞侵袭和迁移的逆转作用。两组间比较采用t检验,多组差异比较采用单因素方差分析。结果 转染siRNA CRNDE后的肺癌SPC-A1细胞中CRNDE表达水平降低（1.01±0.12比0.43±0.06）,细胞增殖能力降低（0.37±0.05比0.24±0.02,F＝10.467,P＆0.05）,细胞侵袭（141.25±15.23比101.02±9.84,F＝9.420,P＆0.05）和迁移（188.20±16.84比142.58±11.22,F＝8.345,P＆0.05）数目减少,细胞中MMP-9、MMP-2、Vimentin蛋白水平下降,E-cadherin蛋白水平升高。CRNDE与miR-384有互补结合位点,CRNDE靶向负调控miR-384表达。miR-384 Inhibitors可以逆转siRNA CRNDE对肺癌细胞增殖（0.26±0.03比0.35±0.04,t＝3.118,P＆0.05）、迁移（139.84±10.57比176.51±12.45,t＝5.276,P＆0.05）、侵袭（99.84±10.02比134.25±11.25,t＝3.890,P＆0.05）能力抑制作用和MMP-9、MMP-2、E-cadherin、Vimentin蛋白表达影响。结论 下调lncRNA CRNDE靶向miR-384抑制肺癌SPC-A1细胞侵袭和迁移。