端粒酶反义寡核苷酸对乳腺癌端粒酶活性及细胞生长的影响

摘要

目的 探讨端粒酶反义寡核苷酸对人乳腺癌细胞端粒酶活性的影响及抑制端粒酶活性以控制乳腺癌细胞生长的可能性.方法 采用10 μmol/L与端粒酶催化亚基(hTRT)mRNA互补的反义寡核苷酸处理乳腺癌细胞;于处理后24、72 h用端粒重复序列扩增及酶联免疫吸附方法 检测细胞端粒酶活性;于处理后72 h以流式细胞术测定细胞周期;于处理后120 h采用原位末端标记法检测细胞凋亡.结果 经hTRT反义寡核苷酸作用后,细胞端粒酶活性明显受到抑制,至作用后72 h,端粒酶活性较对照组降低65.6%(P<0.05);细胞生长明显受到抑制;细胞周期发生显著变化:G0/G1期细胞数增多,S期及G2/M期细胞数则减少;细胞增殖指数由0.46降低至0.25;并可观察到凋亡细胞的出现,凋亡发生率为12.5%;而无义组及空白对照组以上各指标均无明显变化(P>0.05).结论 端粒酶反义寡核苷酸可明显抑制乳腺癌细胞端粒酶活性,抑制细胞生长和增殖,诱导细胞凋亡;表明应用反义技术抑制端粒酶活性治疗乳腺癌具有广阔的前景.