诱导大鼠骨髓内皮祖细胞成内皮细胞的体外增殖规律的观察

摘要

目的观察大鼠骨髓内皮祖细胞(EPCs)体外诱导成内皮细胞的生长增殖规律.方法密度梯度离心得到Wistar大鼠骨髓单个核细胞;以10μg/L血管内皮细胞生长因子(VEGF)和2μg/L碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)体外诱导,通过细胞形态、免疫荧光法观察内皮细胞表型;原代细胞克隆形成率、细胞计数和流式细胞术检测VEGFR-2、VE-钙黏蛋白(cadherin)阳性表达率观察体外增殖能力与表型.结果诱导后细胞呈铺路石样形态.免疫荧光法发现诱导细胞表达小鼠抗大鼠Ⅷ因子(vWF)、VEGFR-2、VE-cadherin和CD31.原代克隆形成率为6.66±0.75;细胞随代次增加增殖能力逐渐下降;VEGFR-2和VE-cadherin在P2与P5中的阳性率差异无显著性(P＞0.05).结论骨髓EPCs在体外可诱导为成内皮细胞,并可保持相对稳定的诱导阳性率.