羟基荧光素二醋酸盐琥珀酰亚胺脂标记大鼠肝脏NK细胞体内转输示踪

摘要

目的利用羟基荧光素二醋酸盐琥珀酰亚胺脂（CFSE）标记大鼠肝脏NK细胞进行体内示踪,观察其在受鼠体内的存活。方法经SD大鼠门静脉转输1×10~6个/mlCFSE体外标记新鲜分离的SD供鼠肝脏NK细胞,于输入后1、3、7、15 d分别切取肝脏和脾脏行冰冻切片免疫荧光观察,并收集门静脉血监测淋巴细胞和中性粒细胞的比例变化。结果 CFSE对大鼠肝脏NK细胞的标记率为98.63%;转输NK细胞后第1天受鼠肝脏内CFSE荧光最强,7 d时荧光变微弱,15 d时荧光基本消失;脾脏在第1、3天时可见较弱荧光,7 d时荧光消失。转输NK细胞后相同时间点肝脏内CFSE荧光均明显强于脾脏。转输肝脏NK细胞的受鼠门静脉血中性粒细胞比例第1天时最高,随时间延长逐渐下降,第15天时基本回复正常水平,淋巴细胞比例仅一过性降低。结论转输的肝脏NK细胞在受体内的数量随时间延长而减少,在受体内的存活时间约为15 d。