骨髓基质干细胞神经分化微小RNA表达谱研究

摘要

目的利用基因芯片筛选出骨髓基质干细胞（BMSCs）诱导分化前后差异表达的微小RNA（miRNA）,寻找可能的神经分化特异性的miRNA。方法从小鼠骨髓中分离骨髓基质干细胞,采用β-巯基乙醇（β-ME）、丁羟基茴香醚（3HA）、维甲酸及碱性成纤维生长因子（bFGF）定向诱导小鼠BMSCs向神经细胞方向分化,用免疫荧光染色进行鉴定。利用基因芯片技术,筛选出分化前后差异性表达的miRNAs,采用实时荧光定量聚合酶链反应（FQ-PCR）技术,对筛选出的差异miRNA进行验证,利用靶基因预测软件对表达差异最明显的miRNA进行靶基因预测。结果 （1）骨髓基质干细胞分化后,细胞呈现典型的神经细胞形态,可见神经样轴突和胞体的锥样改变,免疫荧光染色显示神经元特异性烯醇化酶（NSE）在分化后的细胞中表达。（2）小鼠骨髓基质干细胞分化后一共有18个miRNAs表达升高,4个miRNAs表达下降。FQ-PCR验证结果总体上与芯片检测的结果一致。结论 miRNA在骨髓基质干细胞神经分化过程中大量表达,它们可能对骨髓基质干细胞的神经分化进程起重要的调控作用。