姜黄素通过核因子相关因子-2通路对脊髓损伤小鼠的神经保护作用

摘要

目的探讨姜黄素（CCM）通过核因子相关因子-2（Nrf2）/抗氧化反应元件（ARE）通路对脊髓损伤（SCI）小鼠的神经保护作用。方法采用改良Allen’s击打法制备SCI小鼠模型,将小鼠随机分为Vehicle组和CCM组。术后3 d,干湿称重法测定SCI小鼠脊髓含水量,碘化丙锭（PI）染色检测损伤附近区域坏死细胞数量,二氢乙锭（HEt）染色检测活性氧（ROS）的积累,酶联免疫吸附试验（ELISA）试剂盒检测炎性因子肿瘤坏死因子-α（TNF-α）和白细胞介素-10（IL-10）的表达;术后28 d,Basso Mouse Scale（BMS）评分检测小鼠后肢运动功能,糖水偏好实验评价小鼠情绪状况,Western blot检测Nrf2、超氧化物歧化酶1（SOD1）和苯醌氧化还原酶基因（NQ01）的表达。结果（1）CCM治疗组小鼠脊髓含水量（75.540±1.564）与Veh组比较（85.500±1.297）明显减少,差异有统计学意义（t=4.903,P=0.001）。（2）BMS评分结果显示CCM治疗组第7、14、21和28天后肢运动功能评分[（2.400±0.894）、（3.400±0.894）、（4.200±0.837）和（4.800±0.837）分]与Veh组比较[（1.000±0.707）、（1.800±0.447）、（2.200±0.837）、（3.000±0.707）分,P=0.004]。（3）糖水偏嗜实验表明CMM治疗组和Veh组比较差异有统计学意义[（55.330±1.124）%和（45.740±1.965）%,t=4.314,P=0.002]。（4）对比Veh组,CCM组抑炎因子IL-10表达量（674.20±6.94）明显高于Veh组（525.00±6.43）,而促炎因子TNF-α（763.20±16.24）明显低于Veh组（1 091.00±29.02）,P=0.000、0.000。（5）CCM组ROS的荧光强度（1 377.00±27.06）明显低于Veh组（1 750.00±42.45）,差异有统计学意义（t=7.410,P=0.000）。（6）对比Veh组（72.00±3.81）,CCM组的坏死细胞数量显著减少（53.60±3.20）,差异有统计学意义（t=3.690,P=0.006）。（7）对比Veh组,CCM组Nrf2、S0D1和NQ01的表达量均上调（0.763±0.039、0.442±0.026、0.636±0.023和0.937±0.030、0.692±0.034、0.898±0.025,P=0.025、0.004、0.002）。结论 CCM通过Nrf2通路对脊髓损伤小鼠的神经保护作用。