整合素ανβ3在大鼠青光眼滤过术后结膜瘢痕形成中的作用

摘要

目的观察整合素ανβ3在大鼠青光眼滤过术后结膜瘢痕中的表达,探讨其在滤过术后瘢痕形成中的作用。方法选取SPF级6~8周龄雄性SD大鼠55只,取右眼建立大鼠青光眼滤过术动物模型,剔除建模失败的大鼠15只,采用随机单位组设计分组法将造模成功大鼠分为对照组、转化生长因子(TGF)组、LM609组和TGF+LM609组,每组10只,分别采用含质量分数0.9%氯化钠溶液、TGF-β2(2 mg/ml)溶液、整合素ανβ3受体阻断剂LM609(40μg/ml)溶液和TGF-β2(2 mg/ml)+LM609(40μg/ml)溶液的棉片术中处理结膜瓣2 min。分别于术前及术后3 d、1周、2周采用iCARE眼压计监测眼压,计算术后平均眼压比率(术后眼压/术前眼压×100%);于术后3 d、1周、2周采用裂隙灯显微镜拍照观察滤过泡形态改变,计算滤过泡生存比率;术后2周,摘取各组术眼眼球组织制备石蜡切片,分别采用苏木精-伊红染色和苦味酸-天狼星红染色观察手术区球结膜组织的炎性改变、纤维化程度及胶原纤维沉积情况;采用Western blot法检测整合素αν、整合素β3相对表达量;采用免疫组织化学染色法检测手术区结膜组织整合素ανβ3表达情况。结果各组大鼠术后第3天眼压均较术前明显降低,术后1~2周逐渐恢复至术前水平;对照组、TGF组、LM609组和TGF+LM609组平均眼压比率分别为(101.80±4.44)%、(103.90±5.65)%、(94.10±7.45)%和(100.60±4.61)%,总体比较差异有统计学意义(F=4.571,P=0.010),其中LM609组平均眼压比率均小于对照组、TGF组和TGF+LM609组,差异均有统计学意义(均P<0.05)。术后2周,对照组和TGF+LM609组滤过泡变为扁平状,球结膜组织稍有增厚;TGF组球结膜组织明显增厚,并有大量的血管长入;LM609组仍可见局限的小滤泡,血管化较其他各组明显减少。TGF组滤过泡生存比率明显低于对照组、LM609组和TGF+LM609组,LM609组滤过泡生存比率明显高于对照组和TGF+LM609组,差异均有统计学意义(均P<0.05)。术后2周,LM609组和TGF+LM609组结膜组织中炎性细胞浸润数量均较TGF组减少,胶原纤维沉积较TGF组疏松。TGF组手术区结膜组织中整合素αν、β3相对表达量明显高于对照组、LM609组和TGF+LM609组,差异均有统计学意义(均P<0.05)。免疫组织化学染色结果显示,整合素ανβ3阳性细胞主要集中在手术区及微管周围结膜组织,TGF组手术区结膜组织整合素ανβ3阳性表达细胞数量均较其他组明显增加。结论整合素ανβ3在大鼠滤过术后结膜组织瘢痕中高表达,抑制其表达可减少纤维沉积,延长滤过泡生存时间,提示整合素ανβ3可能参与结膜瘢痕形成过程。