胸腺基质淋巴细胞生成素和白细胞介素-4在变应性结膜炎鼠模型中的促炎作用

摘要

背景研究表明胸腺基质淋巴细胞生成素（TSLP）为类白细胞介素（IL）-17的炎性细胞因子，在多种变应性疾病的发生和发展中发挥关键作用，但是尚未见到关于TSLP是否参与中国常见变应原诱导的变应性结膜炎的报道。目的研究TSLP和IL-4在由中国常见的黄花蒿诱导的变应性结膜炎小鼠模型眼表组织和颈部淋巴结中的表达变化，探讨TSLP和IL-4在变应性结膜炎发病中的作用。方法采用随机数字表法将6-8周龄雌性BALB／c小鼠20只随机分为正常对照组和模型组。将400μl黄花蒿花粉提取液溶解于400μl变应原（抗原）溶媒中制备成抗原溶液，将50μl抗原溶液注射于模型组小鼠足底皮垫下初次致敏，于注射后第10-12天用黄花蒿花粉提取液局部点右眼再次致敏，每日点眼1次；正常对照组小鼠未做任何处理。于造模后第13天采用颈椎脱臼法处死小鼠并摘取眼球，在眼科显微镜下各组分别取16只小鼠32只眼角膜上皮、结膜和颈部淋巴结组织，采用实时定量PCR法检测各种靶组织中TSLP mRNA及IL-4 mRNA的相对表达量，另每组各取4只小鼠8只眼眼睑及眼球制备石蜡切片，采用免疫组织化学法检测角膜、结膜及结膜下组织中TSLP和IL-4蛋白的表达。结果模型组小鼠第2次致敏后0．5h可见小鼠眼睑水肿、结膜充血水肿、溢泪、搔抓眼睑等症状，症状持续6-24h，造模成功率为80％。实时定量PCR结果显示，模型组与正常对照组小鼠角膜上皮均未发现IL-4表达。模型组小鼠角膜上皮、结膜组织和颈部淋巴结组织中TSLP mRNA表达量分别是正常对照组的（1．63±0．20）、（2．71±0．48）和（1．48±0．05）倍，差异均有统计学意义（t=4．44、14．16、5．01，均P〈0．05）；模型组小鼠结膜和颈部淋巴结中IL4mRNA表达量分别是正常对照组的（2．94±0．39）倍和（1．74±0．09）倍，差异均有统计学意义（t=9．92、14．54，均P〈0．05）。免疫组织化学法检测显示，正常对照组小鼠角膜上皮和结膜上皮细胞中TSLP蛋白表达强度微弱，模型组小鼠TSLP蛋白表达增强。模型组小鼠结膜下组织中可见IL4呈强阳性表达，正常对照组小鼠结膜下组织中未发现IL4表达。结论TSLP主要表达于变应性结膜炎小鼠的角膜、结膜和颈部淋巴结组织，提示其参与变应性结膜炎角膜和结膜的炎症反应；IL-4主要表达于变应性结膜炎小鼠结膜下组织中，提示其主要参与结膜的炎症反应，TSLP和IL-4共同参与变应性结膜炎的发生和发展过程，这2种炎症因子为变应性结膜炎的临床治疗提供了新的靶点。