大黄素对高糖介导的大鼠NRK52E TSP1和TGF-β_1表达的影响

摘要

目的:探讨大黄素对高糖介导的大鼠肾小管上皮细胞(NRK52E)血小板反应蛋白1(thrombospondin-1,TSP1)和转化生长因子β1(transforming growth factorβ1,TGF-β1)表达的影响。方法:在NRK52E体外培养的基础上,观察高糖(30mmol/L)诱导下低、中和高浓度的大黄素(10ug/ml、20ug/ml和40ug/ml)对NRK52E TSP1、TGF-β1的mRNA和蛋白表达的影响。采用Real Time PCR检测TSP1、TGF-β1mRNA表达,采用Western blot检测TSP1、TGF-β1蛋白表达。总TGF-β1和活性TGF-β1检测采用ELISA法。结果:与空白对照组比较,高糖(30mmol/L)明显上调了NRK52E TSP1的mRNA表达(3.34±0.18 vs 1.12±0.13;P<20.05)、伴有TGF-β1的mRNA表达增加(3.52±0.22 vs 1.24±0.09;P<20.05)。同时高糖(30mmol/L)也上调了TSP1蛋白表达(0.5184±0.0736 vs 0.1204±0.0376;P<20.01),伴有TGF-β1蛋白表达的增加(0.5698±0.0324 vs 0.1032±0.0322;P<20.01)。与高糖阳性对照组比较,中浓度和高浓度大黄素明显抑制了高糖(30mmol/L)诱导的TSP1、TGF-β1的mRNA(P<20.05;P<20.01)和蛋白表达(P<0.05;P<20.01)。中浓度大黄素干预组总的TGF-β1含量和活性TGF-β1含量均减少,(P<20.05);高浓度大黄素干预组总的TGF-β1含量和活性TGF-β1含量均明显减少(P<20.01)。结论:大黄素能抑制大鼠肾小管上皮细胞TSP1、TGF-β1的mRNA和蛋白表达,并下调总的和活性TGF-β1。