TSHR基因免疫诱导BALB/c小鼠Graves甲亢伴Graves眼病的实验研究

摘要

目的 以BALB/c小鼠多次注射促甲状腺素受体（thyrotropin receptor,TSHR）膜外区A亚单位重组质粒（pcDNA3.1/TSHR289）免疫诱导Graves病（Graves′ disease,GD）伴（或）Graves眼病（Graves′ ophthalmopathy,GO）模型。方法 实验组小鼠（35只）双侧腓肠肌注射pcDNA3.1/TSHR289并电穿孔；对照组（10只）注射无菌生理盐水并电穿孔；空白组（5只）注射无菌生理盐水。各组小鼠均在第1、4、7、10周免疫,免疫前、每次免疫后2周及末次免疫后5周、8周取血检测血清TT4、TSH、促甲状腺素受体刺激性抗体（thyrotropin receptor stimulating antibody, TSAb）、促甲状腺素受体阻断性抗体（thyrotropin receptor stimulating blocking antibody, TSBAb）。CT平扫评估小鼠眼部变化,99mTcO4-显像评估甲状腺摄取功能,HE染色评估甲状腺和眼眶组织病理变化。组间均数比较采用单因素方差分析。结果 GD小鼠2次免疫后即见血清TT4、TSAb和TSBAb均持续显著高于对照组和空白组（分别F＝13.781,31.435,36.112,均P＆0.01）,TSH持续低于对照组和空白组（F＝13.966,P＆0.01）。4次免疫后GD小鼠甲状腺99mTcO4-摄取能力明显增强,甲状腺肿大,腺内大量淋巴细胞浸润,滤泡胶质稀薄。GO小鼠眼CT扫描见眼外肌增粗肿胀,肌腱及肌附着点未见异常。眼外肌和球后组织可见淋巴细胞、透明质酸和脂肪细胞浸润等病理改变。结论 BALB/c小鼠多次肌肉注射pcDNA3.1/TSHR289可成功诱导GD伴（或）GO动物模型。