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慢性染砷大鼠肝脏线粒体DNA及相关酶活性变化研究

         

摘要

目的 探讨慢性染砷大鼠肝脏线粒体DNA(mtDNA)及线粒体相关酶,特别是mtDNA编码酶活性的变化。方法 Wistar大鼠经饮水给75mg/L三氧化二砷6个月。用分光光度法测定肝脏线粒体呼吸酶活性:碱变性法提取大鼠肝脏mtDNA;以PCR大片段扩增法扩增长片段mtDNA;用HindⅢ、EcoRⅠ、SalⅠ、BamHⅠ、MspⅠ、MboⅠ、StuⅠ7种限制性内切酶对扩增片段进行酶切分析。结果 染砷大鼠肝脏线粒体细胞色素C氧化酶(CytCOX)和ATP酶活性下降;而经mtDNA扩增片段凝胶电泳分析和7种限制性内切酶酶切分析,未发现染砷大鼠肝脏参与编码上述2种线粒体酶的4151bp片段有碱基缺失、重复和突变等异常表现。结论 慢性染砷能够导致肝细胞mtDNA参与编码的CytCOX和ATP酶活性下降,进一步证实了染砷对肝细胞及其线粒体的损害作用。但其活性下降的机制,目前尚不能以砷致mtDNA片段的变化来解释,需进一步进行DNA序列分析研究。

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