胰岛素样生长因子-Ⅰ对重症急性胰腺炎大鼠小肠黏膜上皮细胞凋亡的影响

摘要

目的研究外源性胰岛素样生长因子-Ⅰ（IGF-Ⅰ）对重症急性胰腺炎（SAP）大鼠肠黏膜上皮细胞凋亡及凋亡相关基因bax,bcl-2,caspase-3 mRNA表达的影响。方法72只雄性Wistar大鼠按照随机数字表法分为假手术组（SO组）、重症急性胰腺炎组（SAP组）、IGF-Ⅰ治疗组（IGF-Ⅰ组）共三组。通过胰胆管逆行注射5%牛磺胆酸钠制作大鼠SAP模型,SO组用同样方法经胰胆管逆行注射生理盐水;IGF-Ⅰ组分别于术后30 min和术后3 h经后肢内侧皮下注射IGF-Ⅰ。各组动物分别于术后6,12,24 h处死8只,检测血浆淀粉酶,TUNEL法检测小肠黏膜上皮细胞凋亡,观察小肠组织病理学变化并进行病理评分,逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）法检测小肠黏膜上皮细胞中bax,bcl-2和caspase-3mRNA的表达。数据采用SPSS 11.0统计软件分析,多组间比较采用单因素方差分析。结果IGF-Ⅰ治疗组与SAP组各时相点相比,血浆淀粉酶和小肠病理评分均低于各相应时相点,于12 h和24 h差异有统计学意义,均P＜0.05;小肠黏膜上皮细胞凋亡指数IGF-Ⅰ组与SAP组各相应时相点相比均显著降低[6 h:（13.88±1.73）vs.（19.00±2.78）;12 h:（10.13±1.55）vs.（17.63±1.60）;24 h:（9.50±1.07）vs.（17.25±2.76）],P＜0.05;电镜示小肠组织病理变化较SAP组明显改善。bax mRNA表达在SAP组各时点较SO组相应时相点明显增高[6 h:（1.35±0.18）vs.（0.85±0.12）;12 h:（1.21±0.21）vs.（0.86±0.24）;24 h:（1.14±0.24）vs.（0.95±0.22）],6 h即达高峰,而在IGF-Ⅰ组的表达与SAP组相应时相点比较则明显减弱,在12 h和24 h差异具有统计学意义（P＜0.05）,于24 h即接近SO组;caspase-3 mRNA表达在SAP组各时相点较SO组相应时相点明显增高[6 h:（0.78±0.01）vs.（0.55±0.04）;12 h:（0.79±0.04）vs.（0.57±0.05）;24 h:（0.81±0.06）vs.（0.55±0.01）（P＜0.01）],而在IGF-Ⅰ组的表达与SAP组相应时相点比较则明显减弱,在12 h和24 h差异具有统计学意义（P＜0.05）;bcl-2 mRNA的表达在SO组和SAP组均较弱且差异无统计学意义,P＞0.05,而在IGF-Ⅰ组各时相点的表达则明显增强[6 h:（0.65±0.07）vs.（0.54±0.04）vs.（0.57±0.06）;12 h:（0.69±0.04）vs.（0.56±0.05）vs.（0.53±0.05）;24 h:（0.72±0.05）vs.（0.54±0.07）vs.（0.58±0.08）,P＜0.05]。结论外源性IGF-Ⅰ通过拮抗SAP大鼠小肠黏膜上皮细胞的凋亡从而可以减轻SAP大鼠肠黏膜损害,其机制可能与其上调bcl-2 mRNA表达及下调bax,caspase-3 mRNA表达有关。