三氧化二砷对人冠状动脉平滑肌细胞促凋亡作用的体外实验

摘要

目的探讨三氧化二砷对人冠状动脉平滑肌细胞（HCSMC）的促凋亡作用机制及其对损伤动脉再狭窄防治的意义。方法将人冠状动脉平滑肌细胞传代培养,将细胞分为正常对照组、三氧化二砷（浓度分别为1.0,2.0,3.0,4.0,5.0μmol/L）组,通过原位细胞凋亡检测试剂盒（TUNEL）,流式细胞仪检测细胞周期观察三氧化二砷促细胞凋亡作用,WESTERN印迹检测凋亡相关基因Bcl-2和Bax的表达变化,RT-PCR检测三氧化二砷对E2F-1的作用。结果随三氧化二砷浓度的增加它能够抑制HCSMC的增殖并且该作用与时间及三氧化二砷浓度呈正相关(观察第7天、浓度为5.0μmol/L时活细胞数为（4.41±0.10）×10~5/mL与正常对照组（30.11±0.93）×10~5/mL相比较差异具有统计学意义（P＜0.05）,TUNEL可见凋亡细胞由16.0%±3.1%增至38.7%±2.7%（P＜0.05）,流式细胞仪可见4.0μmol/L三氧化二砷作用HCSMC 48 h后代表细胞凋亡的亚二倍体峰在48 h为最多,WEST-ERN印迹可见三氧化二砷上调凋亡促进基因Bax的表达而下调凋亡抑制基因Bcl-2表达。RT-PCR可见E2F-1 mRNA表达于48 h最少（P＜0.05）。正常对照组均不见典型上述变化。结论三氧化二砷可促进HCSMC的凋亡,降低HCASMC转录因子E2F-1 mRNA表达,从而抑制HCASMC的过度增殖、迁移和黏附。