胃黏膜癌变过程中增殖诱导配体及其受体表达水平分析

摘要

目的分析胃癌发生各阶段组织中增殖诱导配体(APRIL)及其受体mRNA的表达水平.方法在APRIL及其受体基因的高保守区设计相应引物和荧光探针,实时检测PCR产物的荧光强度,根据标准品建立标准曲线,由软件自动计算出待测样本中靶基因mRNA的准确含量,并以靶基因和内参β2微球蛋白(β2M)mRNA含量比值作为评价靶基因表达水平的指标.结果采用实时荧光定量PCR(RFQ-PCR)检测靶基因mRNA含量的线性范围为101～109pg/ml,批内和批间重复性测定的变异系数(cv)分别为6.52%～12.02%和8.76%～14.16%.APRIL在肠上皮化生、异型增生和胃癌组织中的表达水平显著高于正常胃黏膜(P＜0.05),在胃癌组织中的表达水平又显著高于肠上皮化生和异型增生(P＜0.05),而其受体B细胞成熟抗原(BCMA)和穿膜蛋白活化物(TACI)在各种胃黏膜病变之间表达水平差异无统计学意义(P＞0.05).结论RFQ-PCR检测APRIL及其受体mRNA含量,具有较好的灵敏度和重复性.APRIL在胃癌病变演进过程中呈现累积和渐进趋势,可能在胃癌发生、发展过程中起重要作用,有可能成为胃癌早期诊断和抗癌治疗的靶分子.肿瘤组织可能还表达APRIL未知受体.