runt相关转录因子3及其甲基化在人胃癌细胞中的表达及调节因素的初步研究

摘要

目的检测不同分化程度胃痛细胞株runt相关转录因子3（RUNX3）基因及其甲基化表达.观察RUNX3 mRNA再表达对胃癌细胞株生物学特性的影响。方法5-氮杂脱氧胞苷（5-AZA-dC）化学处理法和甲基化敏感性聚合酶链反砬（MSP法）检测胃癌细胞RUNX3基因的甲基化状态;采用四甲基偶氮唑盐（MTT）实验检测5氟尿嘧啶（5-FU）对5-AZA-dC处理前、后细胞株的生长抑制率,流式细胞术检测转化生长因子β1（TGF-β1）诱导凋亡的作用。结果①RUNX3在人胃癌细胞SGC7901、MKN45、BGC823中表达.而在MKN28中表达沉默,DNA异常甲基化仪存在于MKN28细胞;②5-AZA-dC处理后,MKN28细胞生长速度显著慢于未处理组,不同浓度5-FU对5-AZA-dC处理后MKN28的生长抑制率显著高于未处理组（P＜0.05）;③TGF-β1诱导5 AZA-dC处理前后MKN28细胞的早期凋亡具有时效性（P＜0.05）.两者联用具有协同凋亡作用（P＜0.05）。结论DNA异常甲基化是MKN28细胞RUNX3表达沉默的重要机制;RUNX3甲基化可被去甲基化剂5-AZA-dC有效逆转;RUNX3 mRNA的再表达可增强MKN28细胞对5-FU的敏感性和对TGF-β1诱导细胞凋亡的能力。