绞股蓝提取物通过调控lncRNA PICSAR对IL-1β诱导软骨细胞损伤的保护作用及机制研究

摘要

目的 探讨绞股蓝提取物对白介素1β(IL-1β)诱导软骨细胞损伤的作用及分子机制.方法 2020年10月—2021年4月于湖北省恩施土家族苗族自治州中心医院进行实验,将关节软骨细胞随机分为对照(NC)组、IL-1β组及绞股蓝提取物低、中、高剂量组、IL-1β+si-con组、IL-1β+si-lncRNA PICSAR组、pcDNA-con+高剂量组、pcDNA-lncRNA PICSAR+高剂量组,分别对其进行干预水平;用细胞计数试剂盒8(CCK-8)检测细胞活力,流式细胞仪检测细胞凋亡情况,蛋白质印迹(Western-blot)法检测裂解的半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3(Cleave-caspase-3)蛋白表达水平;酶联免疫吸附法(ELISA)检测丙二醛(MDA)水平和超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)活性;实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测lncRNA PICSAR表达水平.结果 与NC组比较,IL-1β组细胞活力及SOD、CAT活性降低,凋亡率升高,Cleave-caspase-3表达水平、MDA水平、lncRNA PICSAR表达水平升高(P<0.05).与IL-1β组比较,绞股蓝提取物低、中、高剂量组,软骨细胞活力及SOD、CAT活性依次升高(F/P=119.735/0.000、5.289/0.002、334.948/0.000),凋亡率、Cleave-caspase-3表达水平、MDA水平、lncRNA PICSAR表达水平依次降低(F/P=430.551/0.000、137.513/0.000、383.769/0.000、254.805/0.000).与IL-1β+si-con组比较,IL-1β+lncRNA PICSAR组软骨细胞活力升高,Cleave-caspase-3表达水平降低,细胞凋亡率降低,MDA水平降低,SOD和CAT活性升高(t/P=18.317/0.000、14.884/0.000、27.691/0.000、29.684/0.000、25.008/0.000、28.737/0.000).与pcDNA-con+高剂量组比较,pcDNA-lncRNA PICSAR+高剂量组lncRNA PICSAR表达水平升高,软骨细胞活力降低,Cleave-caspase-3表达水平升高,细胞凋亡率升高,MDA水平升高,SOD和CAT活性降低(t/P=13.349/0.000、14.969/0.000、27.871/0.000、20.234/0.000、24.811/0.000、23.971/0.000).结论 绞股蓝提取物通过下调lncRNA PICSAR抑制IL-1β诱导的软骨细胞凋亡和氧化应激,减轻IL-1β诱导的软骨细胞损伤.