偶联因子6抑制肌球蛋白轻链磷酸化增加跨内皮细胞电阻

摘要

目的 探讨偶联因子6(CF6)对人肺微血管内皮细胞(LMVEC)跨内皮细胞电阻(TER)的影响.方法 体外培养LMVEC,于不同时间给予不同剂量(高剂量:10-6mol/L,低剂量10-7mol/L)的CF6刺激,通过细胞电阻测定仪(ECIS)及Western blot观察其对TER及相关活化信号分子的影响.结果 与对照组比较,CF6刺激组细胞形态无明显改变,但TER值显著增加,随着CF6孵育时间的增加,TER值明显增加,TER(ohm)峰值出现在15h后(1.39 ±0.02 vs 1.00±0.02,P<0.01),增加观察时间至24h发现TER维持在高水平(1.350±0.018 vs 1.000±0.023, P<0.01).用10-6和10-7mol/L的CF6孵育, TER虽剂量增加,但是组间差异无统计学意义(1.39±0.02 vs 1.37±0.01).CF6刺激组明显抑制磷酸化肌球蛋白轻链(p-MLC)水平,但是高、低剂量组间差异无统计学意义(P>0.05).并且和TER测定结果相似,CF6抗体能够中和CF6刺激引起的p-MLC水平降低.结论 CF6可能通过抑制细胞骨架运动调节蛋白p-MLC水平,增加TER,参与内皮细胞渗透性的调节.