丹皮酚上调miR⁃223⁃3p减轻高糖诱导的小鼠心肌微血管内皮细胞损伤的研究

摘要

目的探讨丹皮酚(Pae)对高糖诱导的小鼠心肌微血管内皮细胞(MCMECs)的影响及其作用机制。方法建立HG诱导MCMECs体外模型,分为正常对照组(Con)组、高糖(HG)组、HG+Pae30μmol/L组(HG+Pae30)、HG+Pae60μmol/L组(HG+Pae60)、HG+Pae120μmol/L组(HG+Pae120)。将miR⁃NC、miR⁃223⁃3p mimics、anti⁃miR⁃NC、anti⁃miR⁃223⁃3p转染细胞,分为HG+miR⁃NC、HG+miR⁃223⁃3p组及HG+Pae60+anti(-)、HG+Pae60+anti(+)组。MTT法检测细胞活力,流式细胞仪检测各组细胞凋亡率,RT⁃PCR检测miR⁃223⁃3p、NLRP3 mRNA表达。Western blot法检测Nod样受体热蛋白结构域相关蛋白3(NLRP3)、B淋巴细胞瘤⁃2(Bcl⁃2)、Bcl⁃2相关X蛋白(Bax)、胱天蛋白酶⁃3(Caspase⁃3)蛋白表达。结果60μmol/L Pae改善高糖诱导细胞损伤,用于后续实验。与Con组比较,HG组NLRP3 mRNA、NLRP3、Bax、Caspase⁃3蛋白升高(P<0.05),miR⁃223⁃3p、Bcl⁃2蛋白表达降低(P<0.05)。与HG组比较,HG+Pae60组miR⁃223⁃3p、Bcl⁃2蛋白表达升高(P<0.05),NLRP3 mRNA、NLRP3、Bax、Caspase⁃3蛋白表达降低(P<0.05)。与HG+miR⁃NC组比较,HG+miR⁃223⁃3p组细胞活力、Bcl⁃2蛋白表达升高(P<0.05),细胞凋亡率、NLRP3、Bax、Caspase⁃3蛋白表达降低(P<0.05);与HG+Pae60+anti(-)组比较,HG+Pae60+anti(+)组细胞凋亡率、NLRP3、Bax、Caspase⁃3蛋白表达升高(P<0.05),细胞活力、Bcl⁃2蛋白表达降低。结论Pae可能通过上调miR⁃223⁃3p减轻高糖诱导内皮细胞损伤,并抑制其凋亡。