表皮黑素细胞与毛囊角质形成细胞接触性共培养方法的建立

摘要

目的研究表皮黑素细胞与毛囊角质形成细胞在接触性共培养体系中的相互作用。方法胰酶消化游离毛囊和包皮的表皮,分别获取纯化的角质形成细胞和黑素细胞,第3代毛囊角质形成细胞接种于6孔板中,48h后以表皮黑素细胞：毛囊角质形成细胞为1∶2、1∶10和1∶20的比例接种黑素细胞。在1∶10接种体系中,加α-黑素细胞刺激素和烟酰胺,干预6d后,NKI/beteb单抗染色。结果毛囊角质形成细胞定植后接种黑素细胞,两种细胞均增殖迅速。以1∶10比例接种更能模拟生理状态。1∶20接种可清晰观察到黑素细胞树突与角质形成细胞的接触方式。1∶2接种可获大量黑素细胞。在单纯黑素细胞和共培养体系中,α-黑素细胞刺激素对黑素细胞增殖无明显影响,但树突明显增多、伸长,烟酰胺对单纯黑素细胞培养无影响,共培养状态下,黑素细胞树突收缩,黑素体聚集在胞体周围。结论毛囊角质形成细胞与皮黑素细胞接触性共培养,适用于人色素系统的研究。