C型凝集素1受体参与人中性粒细胞体外杀伤白念珠菌活性的实验研究

摘要

目的探讨人中性粒细胞能否通过C型凝集素1受体（dectin-1）识别白念珠菌细胞壁不溶性β葡聚糖来介导体外杀伤白念珠菌的活性。方法 100 mg/Lβ葡聚糖体外作用于中性粒细胞1、6、24 h后,实时荧光定量逆转录PCR分析dectin-1和Toll样受体2 mRNA表达水平。100 mg/Lβ葡聚糖体外分别刺激中性粒细胞15 min、2 h、6 h,或先用dectin-1抑制剂昆布多糖100 mg/L和50 mg/L预处理30 min后,再予100 mg/Lβ葡聚糖刺激2 h,微量培养板荧光分析法检测中性粒细胞H2O2释放水平。昆布多糖预处理的中性粒细胞与白念珠菌体外共培养后,检测菌落形成单位（CFU）。结果β葡聚糖作用中性粒细胞1、6、24 h后,dectin-1 mRNA水平分别为2.8195±0.1669、5.4859±0.7244、3.6041±0.5372,均明显高于空白对照组（均P＜0.01）。β葡聚糖刺激中性粒细胞15 min后H2O2水平为（64.55±15.67）μmol/L,2 h时为（290.34±30.56）μmol/L,6 h时为（208.54±26.88）μmol/L,与空白对照组（22.05±3.99）μmol/L比较,差异均有统计学意义（均P＜0.01）;100 mg/L和50 mg/L昆布多糖预处理组分别为（80.45±22.41）μmol/L和（130.42±44.55）μmol/L,与β葡聚糖刺激组相比,分别降低了73%和45%,差异均有统计学意义（P＜0.01）。昆布多糖能明显抑制中性粒细胞体外杀伤白念珠菌的活性（均P＜0.01）。结论 Dectin-1参与人中性粒细胞分泌H2O2以及对白念珠菌杀灭活性,为过继性粒细胞转输治疗系统性念珠菌感染提供初步依据。