不同培养基中耐药株及标准株白念珠菌生物膜法尼醇分泌的比较研究

摘要

目的比较不同培养基中白念珠菌耐药株及标准株生物膜法尼醇分泌量的差异, 了解生物膜各时相法尼醇分泌变化趋势, 探讨耐药株法尼醇产生的特点。方法用氟康唑诱导形成白念珠菌耐药株。将白念珠菌标准株及耐药株分别接种到RPMI 1640、酵母浸出粉蛋白胨葡萄糖（YPD）、无氨基酵母氮源（YNB）+ 0.5%葡萄糖（Glu）和RPMI 1640 + 10%胎牛血清（FCS）4种培养基中培养, 构建白念珠菌生物膜。倒置显微镜下观察培养24 h时白念珠菌生物膜形态, 气相色谱-质谱联用（GC/MS）法检测培养1.5、3、6、12、24、36、48 h法尼醇分泌量。结果在相同培养基中, 耐药株及标准株生物膜形态没有明显差异, 但不同培养基中生物膜形态各不相同。三因素重复测量方差分析显示, 白念珠菌生物膜法尼醇的分泌有随时间变化的趋势（F = 70.628, P ＆ 0.001）, 耐药株和标准株生物膜形成过程中, 法尼醇分泌量在RPMI 1640、YPD及YNB + 0.5% Glu培养基中均先逐渐增加, 在生物膜形成后期至成熟期达到高峰值, 随后降低。两种菌株在各培养基中法尼醇浓度达到高峰时间不同。两种菌株分泌法尼醇浓度在RPMI 1640 + 10% FCS培养基中均在12 ～ 48 h呈现缓慢上升趋势。培养基不同会影响法尼醇的分泌（F = 176.665, P ＆ 0.001）, 标准株及耐药株生物膜法尼醇分泌量在YNB + 0.5% Glu培养基中较高。此外, 在RPMI 1640培养基（36 h:1.157 ± 0.064比0.250 ± 0.075, P ＆ 0.05）及YPD培养基（6 h:0.262 ± 0.036比0.055 ± 0.062;12 h:0.730 ± 0.030比0.482 ± 0.024;均P ＆ 0.05）中耐药株生物膜法尼醇分泌量显著高于标准株, 但在YNB + 0.5% Glu培养基中（36 h）标准株法尼醇分泌量显著高于耐药株（2.950 ± 0.677比0.523 ± 0.266, P = 0.020）。结论培养基不同可影响白念珠菌生物膜法尼醇的分泌, 且耐药株与标准株之间法尼醇分泌有一定差异。