大鼠肝脏冷/热缺血再灌注损伤钠钾ATP酶、钙ATP酶及镁ATP酶与肝细胞死亡方式的研究

摘要

目的:研究肝脏冷/热血再灌注损伤条件下,钠钾ATP酶、钙ATPATP酶及镁ATP酶活性与细胞凋亡和胀亡的关系,并探讨减少此类损伤的途径.方法:建立大鼠肝门部分阻断热缺血1h再灌注模型及大鼠原位肝移植冷缺血1h再灌注模型,分别于再灌注0h、1h、12h和72h处死取材,测定肝细胞钠钾ATP酶、钙ATP酶及镁ATP酶活性.用形态学及Annexin V、PI双染法流式细胞仪定量测定早期细胞凋亡和胀亡百分数. 结果:与对照组相比,冷/热缺血1h(再灌注0h)后钠钾ATP酶、钙ATP酶及镁ATP酶活性均持续显著下降,再灌注1h达低谷.但热缺血再灌注后72h钠钾ATP酶活性恢复,钙ATP酶及镁ATP酶活性仍未恢复.冷缺血再灌注后12h钙ATP酶先恢复活性,72h钠钾ATP酶、镁ATP酶活性才恢复.细胞死亡方式:①冷缺血再灌注损伤,细胞死亡以凋亡为主,并于再灌注后12h后到顶峰.②热缺血1h胀亡细胞显著增多,再灌注1h后减少,细胞死亡方式转为以凋亡为主.结论:肝脏冷/热缺血再灌注损伤均能导致3种ATP酶活性下降,细胞内离子浓度失衡,热缺血期ATP酶活性严重下降,细胞死亡,以胀亡为主.冷缺血期ATP酶轻度下降,细胞死亡以凋亡为主.术前或术中给予能量物质,对提高钠钾ATP酶、钙ATP酶及镁ATP酶活性,减轻炎症反应,延长肝门阻断时间有利.