加热对肝癌HepG2细胞肺耐药蛋白表达及耐药性的影响

摘要

目的:研究多次加热对肝癌HepG2细胞肺耐药蛋白(1ung resistanceprotein,LRP)表达的影晌以及加热后HepG2细胞对阿霉素敏感性的变化.方法:肝癌HepG2细胞在42℃恒温水浴箱中加热,60min/次,1次/d,共10d,获取稳定生长的加热HepG2细胞.以未加热HepG2细胞为对照,应用荧光定量PCR和Western Blot检测两种细胞LRP的mRNA和蛋白水平;通过体外细胞毒实验(MTT法)观察阿霉素对两种细胞生长抑制的影响,分析加热后HepG2细胞对阿霉索敏感性的变化;应用流式细胞技术检测两种细胞内阿霉素的平均荧光强度,分析加热对细胞内药物浓度的影响.结果:加热HepG2细胞的LRP mRNA和蛋白水平较未加热HepG2细胞分别增)30(4.01±0.23)和(4.67±0.36)倍,差异有统计学意义(P<0.05);未加热HepG2细胞半数抑制浓度/加热HepG2细胞半数抑制浓度=3.18;应用阿霉素1 h、2 h后,加热HepG2细胞内平均荧光强度分别比未加热HepG2细胞高46.1%和33.9%.结论:加热虽然使LRP表达上调,但不足以引起耐药性增加;加热能够显著提高肝癌HepG2细胞对阿霉素的敏感性,其机制可能与细胞膜通透性增加,细胞内药物浓度增高有关.