高脂食物和K/BxN血清对ApoE基因敲除小鼠免疫系统的影响

摘要

目的 检测高脂食物和K/BxN血清对ApoE基因敲除(ApoE-/-)小鼠免疫细胞分布的影响.方法ApoE-/-小鼠从8周龄开始饲喂高脂食物,17周龄时腹腔注射抗6-磷酸葡萄糖异构酶(glucose-6-phosphate isomerase,GPI)抗体呈阳性的K/BxN血清,每周注射一次,每次注射0.2 mL.对照组饲喂普通食物,用同样的方法注射K/BxN血清.分别于注射K/BxN血清前后,ELISA法检测小鼠血脂水平变化,游标卡尺测量踝关节肿胀程度.高脂食物和K/BxN血清处理至26周龄时分离脾脏细胞和骨髓细胞,经流式抗体染色后,流式细胞术分析免疫细胞的分布情况.结果ApoE-/-小鼠腹腔注射K/BxN血清前后,饲喂高脂食物的ApoE-/-小鼠血清低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)浓度,总胆固醇(TCHO)浓度和甘油三酯(TG)浓度均显著升高,主动脉瓣根部斑块面积显著增加,提示无论是否注射K/BxN血清,高脂食物都能使ApoE-/-小鼠产生动脉硬化症状,且比饲喂普通食物的ApoE-/-小鼠更严重.腹腔注射K/BxN血清前,各组ApoE-/-小鼠踝关节和关节炎评分(clinical score)均处于正常水平,腹腔注射K/BxN血清后,饲喂高脂食物的ApoE-/-小鼠踝关节宽度和关节炎评分均低于饲喂普通食物的ApoE-/-小鼠.流式检测结果显示,饲喂高脂食物后注射K/BxN血清使ApoE-/-小鼠脾脏和骨髓的CD3+T细胞和CD19+B细胞下调,CD11b+巨噬细胞上调.结论高脂食物和K/BxN血清引起ApoE-/-小鼠脾脏和骨髓的CD3+T细胞和CD19+B细胞下调,CD11b+巨噬细胞上调,导致ApoE-/-小鼠的动脉硬化症状加重,关节炎症状减轻.