三种冷冻保护剂对新生小鼠睾丸组织冷冻效果的比较

摘要

目的 探讨三种不同冷冻保护剂对新生C57BL/6J小鼠睾丸冷冻的效果.方法 5日龄C57BL/6J雄鼠睾丸组织,分别用3种不同冷冻保护剂(二甲基亚砜＜ dimethyl sulfoxide,DMSO＞、丙二醇＜propylene Glycol,PROH＞、EFS20/40)进行玻璃化冷冻.复苏冷冻后的睾丸组织,每组一部分进行组织学分析,另一部分进行组织移植,移植后检测关键基因表达水平以及卵胞质内单精注射,并设相应对照组.结果 3个实验组睾丸组织形态改变与对照组相比均具有显著性差异(P＜0.01),其中EFS组分值最低即改变最小;原位移植8周后组织块生长发育,存活率分别为DMSO组16.7％、PROH组13.3％、EFS组23.3％,存在成熟精子;睾丸组织特异性基因pgk-2和TESK1正常表达;卵胞质内单精注射表明移植后睾丸内精子均具有受精能力,胚胎移植后可得到正常子代小鼠(DMSO:PROH:EFS=5:2:8).结论 3种冷冻保护剂均能良好保存睾丸组织结构和功能.其中,EFS方法保存的睾丸组织形态改变最小、功能完善更适于睾丸组织的冷冻.