壁虎粗多肽诱导食管癌KYSE450细胞凋亡机制研究

摘要

目的研究壁虎粗多肽(GCP)体外对食管癌KYSE450细胞的增殖抑制作用。方法取对数生长期细胞,种板,用不同浓度的(0.10,0.15,0.20,0.25,0.30,0.35,0.4,0.45,0.50,0.55,0.6 mg·mL^(-1))GCP处理KYSE450细胞24,48,72 h,通过噻唑蓝比色法(MTT)检测细胞增殖,根据MTT结果,将实验分组为空白组(0)和低、中、高3个浓度(GCP:0.1,0.15,0.22 mg·mL^(-1))实验组与对照组(10μg·mL^(-1)阿霉素)。以免疫印迹法检测GCP对KYSE450细胞内B淋巴细胞瘤-2基因(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3(Caspase-3)、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-9(Caspase-9)蛋白表达的影响。结果 GCP处理KYSE450细胞24,48,72 h后,半数抑制浓度(IC_(50))值分别为0.32,0.28,0.24 mg·mL^(-1)。空白组和低、中、高3个浓度实验组与对照组的Bax与Bcl-2灰度比值平均分别为(23.83±0.07)%,(51.08±0.78)%,(148.26±6.19)%,(329.33±4.44)%,(115.84±0.26)%;这5组的Caspase-9与甘油醛-3-磷酸脱氢酶(GAPDH)灰度比值平均分别为(14.81±1.05)%,(20.91±1.24)%,(39.61±1.89)%,(43.68±1.13)%,(39.82±0.69)%;这5组的Caspase-3与GAPDH灰度比值平均分别为(6.37±0.51)%,(10.97±0.50)%,(13.44±0.49)%,(17.03±0.49)%,(8.63±0.42)%。以上各项指标,与空白组比较差异均有统计学意义(P<0.05,P<0.01)。结论 GCP可抑制KYSE450细胞增殖并诱导其凋亡,其机制与Caspase依赖性途径有关。