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龙葵碱通过调节miR-140和结肠癌转移相关基因1调控胃癌细胞增殖和凋亡

         

摘要

目的探讨龙葵碱对胃癌细胞增殖、凋亡的影响及其潜在分子机制。方法转染前,将胃癌SGC-7901细胞分为4组:对照组(常规培养)、低、中、高剂量龙葵碱组(分别给予25,50,100μg·mL-1龙葵碱处理48 h)。选用100μg·mL-1龙葵碱进行后续实验。将miRNA模拟物(miR-mimics)、miRNA抑制剂(miR-inhibitor)阴性对照及miR-140-mimics、miR-140-inhibitor分别转染至SGC-7901细胞,分别命名为第1转染组、第2转染组、第3转染组、第4转染组。将第3转染组和第4转染组细胞分别给予100μg·mL-1龙葵碱处理,分别命名为第5转染组和第6转染组。用噻唑蓝(MTT)法和流式细胞仪分别检测细胞增殖和凋亡情况,用实时荧光定量链式聚合酶反应(RT-qPCR)检测miR-140、结肠癌转移相关基因1(MACC1) mRNA相对表达量表达。结果对照组、高剂量龙葵碱组、第1转染组、第2转染组、第3转染组、第4转染组、第5转染组、第6转染组的细胞增殖率分别为(100.00±9.56)%,(45.88±6.22)%,(98.26±8.64)%,(64.27±5.73)%,(97.21±6.28)%,(152.87±11.05)%,(65.38±6.24)%,(93.24±7.68)%;细胞凋亡率分别为(4.68±0.56)%,(34.97±2.86)%,(4.46±0.54)%,(21.79±2.55)%,(5.31±0.58)%,(2.31±0.42)%,(21.56±2.42)%,(11.63±1.58)%;miR-140相对表达量分别为1.00±0.14,3.76±0.54,0.96±0.08,3.56±0.34,1.00±0.09,0.37±0.05,3.97±0.39,1.58±0.13;MACC1 mRNA相对表达量分别为1.00±0.08,0.44±0.06,0.97±0.07,0.47±0.05,0.99±0.08,2.16±0.17,0.56±0.06,0.92±0.07。以上指标,高剂量龙葵碱组与对照组比较,第2转染组和第1转染组比较,第4转染组和第3转染组比较,第6转染组和第5转染组比较,差异均有统计学意义(均P<0.05)。结论龙葵碱可能通过上调miR-140表达并下调MACC1表达,抑制胃癌SGC-7901细胞增殖并促进细胞凋亡。

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