靶向磷酸二酯酶5的短发夹RNA重组腺病毒载体对小鼠急性心梗后早期细胞凋亡的影响

摘要

目的探讨靶向持续抑制磷酸二酯酶5(PDE5)的短发夹RNA(shRNA)[PDE5 shRNA]重组腺病毒载体对小鼠急性心梗后早期细胞凋亡的影响。方法结扎小鼠左冠状动脉前降支建立小鼠心肌梗死模型,随机分为实验组10例,将携带有PDE5 shRNA重组腺病毒载体注射到心肌梗死区及周边区和对照组10例,将没有插入PDE5 shRNA的普通腺病毒载体注射到心肌梗死区及周边区。1周后,进行免疫组化和原位末端标记分析(TUNEL)检测梗死及梗死周边细胞凋亡情况,酶联免疫吸附实验(ELISA法)检测环磷酸鸟苷(c GMP)和蛋白激酶G(PKG)的表达,蛋白印迹分析检测各组PDE5的表达情况。结果心梗1周后,和对照组相比较,实验组小鼠梗死区及梗死周围区域细胞凋亡明显减少(P<0.05),梗死周边心肌细胞凋亡明显减少(P<0.05),实验组小鼠心肌PDE5表达明显减少,c GMP和PKG表达明显上调(P<0.05)。结论 PDE5 shRNA的干预可以明显减少心肌梗死及梗死周边区细胞凋亡和非梗死区心肌细胞凋亡,可能与上调c GMP和PKG的表达密切相关。