RNA干扰抑制RPS12基因表达对胃癌细胞凋亡的影响及分子机制探讨

摘要

目的:探讨RPS12基因特异的RNA干扰对胃癌BGC823细胞凋亡的影响及机制.方法:设计并构建RPS12特异性shRNA表达载体(RPS12-shRNA),以Lipofectamine 2000介导将RPS12特异性shRNA及Scram-ble-shRNA表达载体分别转染胃癌细胞.RT-PCR方法检测BGC823细胞中RPS12基因及凋亡相关基因Bcl-2和BaxmRNA的表达,流式细胞术(flow cytometry,FCM)分析RNA干扰对细胞凋亡的影响.结果:RT-PCR结果显示,RPS12-shRNA表达载体转染第3、5、7天后.RPSl2基因表达低于对照组,其中第5天下调最明显.RPS12特异性RNA干扰第5天、第7天后,Bcl-2mRNA表达明显下调,BaxmRNA表达无明显改变.流式细胞术分析结果显示,RNA干扰RPS12基因第7天后,胃癌细胞凋亡率(17.84%)明显高于对照组(1.89%).结论:RNA干扰RPS12基因促进胃癌细胞凋亡作用可能是其作为上游基因通过下调Bcl-2基因表达而实现的.