小鼠子宫颈癌U14细胞系的建立及生物学特性研究

摘要

目的:建立小鼠宫颈癌肿瘤细胞系,观察其生物学特性.方法:采用肿瘤原代培养法对小鼠U14肿瘤进行体外传代培养.定期对培养细胞进行形态学观察,进行免疫组织化学鉴定、细胞周期检查、染色体检测、细胞生长测定,进行615、C57BL/6j小鼠移植观察体内成瘤情况,并用pEGFP-NI质粒转染U14细胞.结果:细胞呈贴壁和悬浮混合生长.CK阳性特征.体外连续培养10个月,传代50代,细胞倍增时间为21.83h.细胞周期测定G1期为34%,G2期为26.4%,S期为39.6%.培养U14细胞3～4天处于对数生长期,染色体为亚四倍体核型,众数为64～84条.615小鼠、C57BL/6j小鼠移植成瘤率均为100%,无支原体污染.建立了GFP(+)的U14-GFP单克隆细胞株.结论:成功建立了小鼠U14子宫颈癌细胞系及GFP标记的U14-GFP细胞株.体内移植可建立常规及带荧光标记的肿瘤模型,可用于体内体外相结合的肿瘤研究.