环氧合酶-2基因沉默对食管鳞癌花生四烯酸代谢通路的影响

摘要

目的：探讨siRNA沉默环氧合酶-2(COX-2)对食管鳞癌(ESCC)细胞增殖的影响,观察花生四烯酸(AA)代谢酶COX-2和5-脂氧合酶(5-LOX)、其下游产物PGE2和LTB4及细胞凋亡相关基因表达的变化,寻找低浓度COX-2酶抑制剂引起AA代谢转向5-LOX途径并促进ESCC细胞增殖的解决方案.方法：设空白对照、脂质体对照、随机序列siRNA和COX-2 siRNA组,筛选高效COX-2 siRNA序列作用于ESCC细胞株TE-1及Eca109,四唑单钠法检测细胞增殖、RT-PCR和Western blot检测mRNA及蛋白、ELISA法检测PGE2和LTB4,流式细胞技术检测细胞周期.结果：与空白对照组相比,COX-2 siRNA转染后,TE-1及Eca109细胞出现增殖抑制(抑制率分别为45.86%和48.99%,均P<0.05)；COX-2 mRNA、蛋白表达及PGE2下降(P<0.05),5-LOX表达及LTB4无明显变化(P>0.05)；G1期细胞比例分别为63.16%和68.15%(空白对照组分别为58.93%和33.02%,P<0.05)；Bcl-2 mRNA及蛋白表达下降而Caspase-9、Bax表达上调(P<0.05).结论：高效COX-2抑制可以避免COX-2低水平抑制引起的AA向5-LOX途径代谢分流,从而有效实现ESCC细胞增殖抑制.%10.3969/j.issn.1000-8179.2012.23.002