光照对视网膜色素上皮细胞分泌多巴胺功能的影响

摘要

目的:检测体外培养的猪视网膜色素上皮（RPE）细胞多巴胺（DA）分泌水平,观察光照和多次传代对其分泌DA功能的影响。方法:酶消化法获得猪RPE细胞。纯化并鉴定后观察原代RPE细胞的生长曲线。第2代细胞分为正常培养组、光照组和遮光组进行培养。高效液相色谱法检测DA量。ELISA法测定其分泌脑源性神经营养因子（BDNF）、胶质源性神经生长因子（GDNF）的水平。结果:免疫细胞化学鉴定显示原代RPE细胞纯度高,生长曲线显示第1～4天为其指数生长期。DA分泌在传代后第2天开始检测到,第4天达高峰以后缓慢下降并趋稳定。多次传代后DA分泌量无显著变化。光照刺激24h后DA分泌增加,HVA、GDNF和BDNF变化不显著。结论:猪RPE细胞体外生长旺盛,易于纯化和传代。能够持续分泌DA且不受多次传代的影响。光照刺激可以使RPE分泌DA增加。