核磷蛋白A型突变体对髓性白血病细胞系增殖的影响

摘要

目的 研究核磷蛋白A型突变体基因转染对人髓性白血病细胞系体外增殖的影响.方法 构建含核磷蛋白A型突变基因(NPM-mA)的真核表达质粒pEGFPC1-NPM-mA,选择NPM-mA阴性、抑癌基因p14ARF有无缺失的两株人髓性白血病细胞KG-1a和K562作为靶细胞,将pEGFPC1-NPM-mA重组质粒和pEGFPC1空质粒分别转染白血病细胞,以未转染组为对照.用RT-PCR和免疫组化来分析转染细胞目的基因mRNA和蛋白质的表达.采用台盼蓝拒染法计数活细胞,绘制转染前后生长曲线,观察细胞体外生长的改变.结果 转染后的两种白血病细胞株表达NPM-mA mRNA,胞浆内NPM-mA蛋白阳性,符合NPM突变蛋白胞质移位的特点.细胞生长曲线显示,转染NPM-mA质粒的KG-1a细胞较空质粒转染和未转染组细胞生长速度明显加快,而转染NPM-mA质粒的K562细胞则较对照组细胞生长明显受抑制(P＜0.05).结论 NPM-mA基因稳定转染可影响白血病细胞的增殖活性,在无ARF缺失时NPM-mA突变体可促进白血病细胞体外生长.