应用PCR-SSCP技术检测结核分枝杆菌耐链霉素相关基因rpsL和rrs突变

摘要

目的应用聚合酶链反应-单链构象多态性（PCR-SSCP）技术,建立快速检测结核分枝杆菌链霉素耐药相关基因rpsL和rrs突变的新方法。方法采用常规药敏试验检测112株结核分枝杆菌临床分离株对链霉素的耐药性,建立PCR-SSCP法检测耐药相关基因rpsL和rrs的突变。采用PCR直接测序技术（PCR-DS）确定rpsL和rrs基因突变情况并与PCR-SSCP法检测结果进行比较。结果 112株结核分枝杆菌临床分离株均携带rpsL和基因,52株（46.4%）对链霉素敏感,其中有1株敏感菌株rrs基因PCR-SSCP条带异常,PCR-SSCP方法的特异性为98.1%（51/52）。60株（53.6%）结核分枝杆菌对链霉素耐药,用PCR-SSCP方法分别检出46株（76.6%）rpsL基因和11株（18.3%）rrs基因条带异常,1株同时出现rpsL和rrs基因条带异常,PCR-SSCP检测的灵敏度为93.3%（56/60）。结论 PCR-SSCP方法检测结核分枝杆菌耐药相关基因rpsL和rrs突变的特异性和敏感性高,临床上值得推广应用。