人神经干细胞移植联合环孢素A对小鼠局灶性脑缺血模型的作用

摘要

目的 评估人胚神经干细胞(NSCs)移植在小鼠脑缺血模型中的作用,并探讨其联合使用免疫抑制剂对脑缺血模型疗效的影响.方法 选用雄性清洁级C57B6/L小鼠50只,对动物进行标准饲养.造模前,对实验小鼠进行行为学评价,包括转棒实验和角落实验,小鼠在转棒仪上的运动时间≥300 s为完成了转棒实验测试,可纳入进行后续的实验;角落实验共进行10次测试,10次中连续3次未连续向左或右转向的小鼠为完成了角落实验测试,可被纳入进行后续的实验.用线栓法对完成行为学训练的C57B6/L小鼠制作脑缺血模型.造模术后72 h对实验小鼠进行头部MR T2加权成像检查,将梗死体积≥同侧半球20％的小鼠纳入实验.50只C57B6/L小鼠,排除未完成行为学训练2只、造模术后死亡6只、梗死体积A组>C组,两两比较差异均有统计学意义(均P<0.01).(4)人胚NSCs移植后第4周,A、B组小鼠移植核心区域人胚NSCs细胞存活数量分别为(27510±9558)、(54788±11711)个,移植核心区域人胚NSCs细胞存活数量B组大于A组,差异有统计学意义(t=4.91,P<0.01).人胚NSCs移植后第4周,免疫荧光染色显示,A、B组小鼠植入的人胚NSCs大部分停留在移植核心区域,少数向四周迁移;人胚NSCs细胞分化为神经元,呈黄色荧光;人胚NSCs部分分化为星形胶质细胞,呈黄色荧光.结论 人胚NSCs移植治疗能改善小鼠缺血后的神经功能恢复,减少梗死体积,其联合使用免疫制剂可进一步减少梗死体积,并增加人胚NSCs的存活数量.