由cAMP激活的鸟苷酸交换蛋白(Epac1)调控内皮细胞表面膜联蛋白A2的表达

摘要

目的本研究旨在探讨内皮细胞内Epac1是否参与调控细胞表面膜联蛋白A2(ANXA2)的表达.方法以人静脉内皮细胞(HUVECs)为细胞模型,采用原子动力学检测方法,结合免疫荧光,分别从原子及蛋白水平验证Epac1是否参与细胞表面ANXA2表达的调控作用.分别提取15只Epac1基因敲除小鼠和15只C57BL6野生型小鼠血浆,检测每组样品ANXA2的表达水平.结果①免疫荧光测得对照组(ESI09)相对荧光强度为17.59±0.69,处理组(ESI09)相对荧光强度为6.32±0.32,两组间数据结果有差异且有统计学意义(P<0.01);原子动力显微镜法测得处理组(ESI09)测得力值为(35113.07±9866.65)pN,对照组(DMSO)测得力值为(106277.70±14233.77)pN,两组间数据结果有差异且有统计学意义(P<0.01);由以上数据可知药物性抑制内皮细胞Epac的功能使其表面ANXA2表达量下调;②蛋白印迹法及酶联免疫吸附法测得处理组(ESI09)和对照组(DMSO)内皮细胞分泌ANXA2有差异,药物性抑制内皮细胞Epac1功能使内皮细胞胞外分泌ANXA2能力下降低;③酶联免疫吸附法测得Epac1基因敲除小鼠组血浆ANXA2平均含量为(138.81±38.93)ng/ml,显著低于野生型小鼠组血浆ANXA2平均含量(281.46±49.66)ng/ml(P<0.05).结论Epacl参与调控内皮细胞表面ANXA2的表达.