番茄红素通过抑制内质网应激减轻小鼠心肌细胞缺氧复氧损伤

摘要

目的观察番茄红素（lyc）对缺氧复氧（H/R）引起的小鼠心肌细胞内质网应激及细胞凋亡的影响。方法 C57BL/6乳鼠心肌细胞培养72 h后随机数字表法分为4组,即正常对照组（对照组）、lyc组（lyc 5μmol/L预处理）、H/R组（缺氧4 h,复氧6 h）和lyc+H/R组（lyc 5μmol/L预处理4 h后H/R处理）。采用CCK-8法检测心肌细胞存活率,AnnexinV-PI检测心肌细胞凋亡率,实时荧光定量聚合酶链反应检测转录激活因子6（ATF6）、真核细胞起始因子2α（eIF2α）和剪切X盒结合蛋白1（sXbp-1）mRNA的表达水平。蛋白印迹法检测葡萄糖调节蛋白78（GRP78）、C/EBP同源蛋白（CHOP）、B细胞淋巴瘤基因-2（Bcl-2）和Bcl-2相关X蛋白（Bax）蛋白的表达水平。氧自由基（ROS）试剂盒检测细胞内ROS含量。结果 H/R组乳鼠心肌细胞存活率明显低于对照组[（64.28±6.12）%比（100.00±4.98）%,P＜0.01],心肌细胞凋亡率明显高于对照组[（24.42±1.76）%比（5.16±1.31）%,P＜0.01],Bax/Bcl-2蛋白表达水平比值明显高于对照组（2.33±0.20比1.00±0.09,P＜0.01）,CHOP蛋白表达水平明显高于对照组（1.98±0.15比1.00±0.12,P＜0.01）,GRP78蛋白表达水平明显高于对照组（2.09±0.11比1.00±0.09,P＜0.05）,ATF6、eIF2α和sXbp-1 mRNA表达水平均明显高于对照组（P均＜0.01）,心肌细胞内ROS含量明显高于对照组[（262.13±22.03）%比（100.00±12.35）%,P＜0.01]。而lyc+H/R组乳鼠心肌细胞存活率明显高于H/R组[（81.75±6.85）%比（64.28±6.12）%,P＜0.01],细胞凋亡率明显低于H/R组[（17.24±2.02）%比（24.42±1.76）%,P＜0.01],Bax/Bcl-2蛋白表达水平比值明显低于H/R组（1.64±0.13比2.33±0.20,P＜0.01）,CHOP蛋白表达水平明显低于H/R组（1.54±0.12比1.98±0.15,P＜0.01）,GRP78蛋白水平明显低于H/R组（1.53±0.12比2.09±0.11,P＜0.01）,ATF6、eIF2α和sXbp-1 mRNA表达水平均明显低于H/R组（P均＜0.05）,心肌细胞内ROS含量明显低于H/R组[（171.18±19.09）%比（262.13±22.03）%,P＜0.01]。结论 lyc可减轻心肌细胞H/R损伤,机制可能与抑制内质网应激,从而阻碍其激诱导的心肌细胞凋亡有关。