关附庚素对HERG钾通道电流及通道动力学的影响

摘要

目的 用膜片钳全细胞记录法评价关附庚素(GFG)对HERG基因表达的快速激活延迟整流钾通道电流(IKr)及通道动力学的影响.方法 使用脂质体介导的瞬时转染法把野生型HERG基因转染人人胚肾细胞(HEK293),采用标准的全细胞膜片钳技术记录IKr通道电流,观察不同浓度(3、12.5、50、200和1 000 μmol/L)的GFG对IKr和通道动力学的作用.结果 GFG对IKr的尾电流(Itail)具有浓度依赖性抑制作用,半数最大抑制浓度为17.9μmol/L,Hill常数为0.75.50μmol/L GFG使得刺激电流(Istep)和Itail的最大峰值电位前移,呈电压依赖性,但不改变激活电位.50μmol/L GFG对IKr具有时间依赖性阻断效应,时间延长抑制效果增强.50μmol/L GFG使激活曲线左移,半数激活电压从(-2.15±1.94)mV改变为(-9.22±2.43)mV(n=5,P＜0.05),但对曲线的斜率因子k无显著影响;50 μmol/L GFG使得稳态失活曲线左移,半数失活电压从(-56.9±1.2)mV改变为(-64.2±1.5)mV(n=6,P＜0.05),但不影响曲线斜率因子k.50 μmol/L GFG加快通道的失活,在-60 mV以上能加快通道的失活后恢复时间,并可显著减慢通道的去激活时间.结论 GFG对HERG基因表达的IKr通道电流具有浓度、电压和时间依赖性阻断作用,主要是通过结合通道的激活态和失活态发挥抑制效应.