甲基莲心碱逆转肝癌HepG2/thermotolerance细胞对阿霉素耐受性的作用

摘要

背景与目的:如何成功地逆转耐热癌细胞的多药耐药性(multidrug resistance,MDR)是当前肿瘤热疗的研究热点。本研究探讨耐热肝癌细胞能否对阿霉素(adriamycin,ADR)产生耐受性,以及甲基莲心碱(neferine,Nef)能否逆转耐热肝癌细胞的阿霉素耐药性。方法:MTT法检测肿瘤细胞存活率,PI染色流式细胞仪检测细胞凋亡率,间接免疫荧光流式细胞术检测bcl-2表达。结果:在43℃环境中培养24h后,耐热肝癌细胞HepG2/thermotolerance的细胞存活率和细胞凋亡率分别为(89.6±5.4)%和(13.6±5.4)%,而非耐热肝癌细胞HepG2的细胞存活率和细胞凋亡率分别为(23.9±3.6)%和(68.9±7.3)%。正常培养环境情况下(37℃),ADR对HepG2/thermotolerance细胞的IC50为(113.7±12.7)μmol/L,而对HepG2细胞的IC50为(10.5±2.3)μmol/L,耐药倍数达10.8倍。1、10、100μmol/LADR分别作用24h后,HepG2/thermotolerance细胞的凋亡率分别为(9.3±2.6)%、(17.8±7.3)%和(32.9±8.6)%,而HepG2细胞的凋亡率分别为(14.3±3.9)%、(38.9±6.8)%和(62.7±5.9)%。在37℃培养环境下,10、40μmol/LNef对HepG2细胞和HepG2/thermotolerance细胞无增殖抑制作用和凋亡诱导作用,但可使ADR对HepG2/thermotolerance细胞的IC50分别下降至(63.7±5.6)μmol/L和(16.8±2.8)μmol/L,逆转倍数分别为1.78和6.79,并可使10μmol/LADR对HepG2/thermotolerance细胞凋亡的诱导作用升高至(26.8±5.9)%和(34.9±8.7)%;HepG2/thermotolerance细胞较HepG2细胞高表达Bcl-2蛋白,而Nef能下调HepG2/thermotolerance细胞的Bcl-2表达。结论:HepG2/thermotolerance细胞对ADR可产生耐受性,Nef可逆转HepG2/thermotolerance细胞对ADR的耐受性,其机制可能与其下调HepG2/thermotolerance细胞Bcl-2蛋白表达有关。