银离子产品的含量特性及细胞毒性检测

摘要

目的 分析含银产品的银含量、均匀性及细胞毒性。方法 （1）从市场上购买的5种含银产品A、B、C、D、E,其中前4种为液体或凝胶形式、含银产品E为敷料形式。采用火焰法测定各产品银含量及产品E的均匀性,样本数为3。（2）选用人肝癌细胞株（HepG2）作为评价模型,将A、B、C、D 4种含银产品分别用DMEM高糖培养液进行1∶100、1∶200、1∶400、1∶800的倍比稀释后培养细胞,以含20 μg/mL硝酸银的DMEM高糖培养液培养细胞为阳性对照、DMEM高糖培养液培养细胞为空白对照,采用噻唑蓝法测定细胞存活率,样本数均为5。（3）将含银产品A配制成0.031 3、0.062 5、0.125 0、0.250 0 μg/mL 4种质量浓度处理HepG2细胞,采用含294 μg/mL重铬酸钾、胎牛血清的DMEM高糖培养液处理细胞为阳性对照、采用含胎牛血清的DMEM高糖培养液处理细胞为空白对照,采用Hoechst33258染色法检测细胞凋亡率,采用彗星实验检测细胞彗星尾矩、尾长及尾部DNA百分比判断DNA损伤,样本数均为3。对数据行单因素方差分析、LSD-t检验。结果 （1）A、B、C、D含银产品的银含量依次为（256.5±1.5）μg/mL、（271.5±1.3）μg/mL、（652.4±2.6）μg/g、（330.0±2.1）μg/g,与标示含量吻合。含银产品E的银含量为（0.158±0.013）mg/g、单片产品E的银含量为（0.125±0.017）mg/g,均匀性良好。（2）与空白对照处理比较,产品A在稀释比1∶100、产品B在稀释比1∶100及产品C在稀释比1∶100、1∶200处理时细胞存活率均显著降低（t=35.506、8.914、37.594、30.693,P＆0.01）。与阳性对照处理比较,产品A在稀释比1∶200、1∶400、1∶800及产品C在稀释比1∶400、1∶800与产品B、D在各稀释比处理时细胞存活率均显著升高（t=27.537、18.262、18.709,26.333、41.762,15.776、19.759、20.443、15.715,26.792、24.963、31.803、30.537,P＆0.01）。（3）0.250 0 μg/mL产品A及阳性对照处理细胞的凋亡率分别为（6.1±0.4）%、（62.2±3.9）%,明显高于空白对照处理细胞的（3.3±0.7）%（t=13.327、30.475,P＆0.05）；0.031 3、0.062 5、0.125 0 μg/mL产品A处理细胞的凋亡率分别为（2.9±0.4）%、（3.1±0.4）%、（4.2±0.9）%,与空白对照处理时相近（t=1.181、0.133、1.097,P＆0.05）。（4）0.125 0、0.250 0 μg/mL产品A处理细胞时,尾矩、尾长、尾部DNA百分比明显高于空白对照处理（t=29.026、51.194,21.851、36.138,24.721、50.455,P＆0.05或P＆0.01）。0.031 3、0.062 5 μg/mL产品A处理细胞时,尾矩、尾长、尾部DNA百分比与空白对照处理比较,差异无统计学意义（t=5.878、3.429,2.779、1.960,1.328、7.763,P＆0.05）。结论 5种含银产品含量均达到各标识要求；产品C浓度较其他产品更高,导致HepG2细胞存活率下降的可能性更大,建议银离子产品在浓度设置方面以产品A、B为参考；产品浓度越高对细胞DNA可能存在更高的损伤风险,不建议相关产品为了达到更好抗菌效果而一味调高含银量。