垃圾填埋场中厌氧真菌18S rDNA的PCR扩增及鉴定

摘要

采用机械破壁法直接从来自7个不同地区的垃圾填埋场滤液样本中提取真菌DNA,应用真菌通用引物NS1和NS8扩增18S rDNA(约1800bp),多聚酶链式反应(PCR)产物的琼脂糖凝胶电泳结果表明所有的样本均得到了扩增;以PCR产物作为模板,采用厌氧真菌Chytridiomycetes科的专用引物Chyt-719和Chyt-1553进行二次PCR扩增(约857bp),该阳性扩增产物克隆和测序结果首次表明在食草动物瘤胃中存在的厌氧真菌 Chytridiomycetes也存在于垃圾填埋场中,且为Neocallimastix属.